色譜填料運用創(chuàng)新性熔融核技術(shù)制備的HALO色譜柱,已經(jīng)在液相色譜領(lǐng)域引起了極大的反響。采用該技術(shù)制備的填料也被稱作為表面多孔顆粒以及核殼型色譜填料,*的結(jié)構(gòu)特征使得制備出的UHPLC與HPLC色譜柱具有超高柱效、 高流速下低譜帶展寬、相對較低的反壓、出眾的耐用性和穩(wěn)定性等特點。
下面讓我們再來了解一下色譜填料的分類有哪些吧:
(1)、硅膠填料
硅膠填料主要應(yīng)用正相色譜及反相色譜柱中,正相色譜用的固定相通常為硅膠(Silica),以及其他具有極性官能團,如胺基團(NH2,APS)和氰基團(CN,CPS)的鍵合相填料。
由于硅膠表面的硅羥基(SiOH)或其他團的極性較強,因此,分離的次序是依據(jù)樣品中的各組份的極性大小,即極性強弱的組份被沖洗出色譜柱。正相色譜使用的流動相極性相對比固定相低,如:正乙烷(Hexane),(Chloroform),二氯甲烷(Methylene Chloride)等。
反相色譜填料常是以硅膠為基礎(chǔ),表面鍵合有極性相對較弱的官能團的鍵合相。反相色譜所使用的流動相極性較強,通常為水,緩沖液與甲醇,已腈等混合物。樣品流出色譜柱的順序是極性較強組合被沖出,而極性弱的組份會在色譜柱上有更強的保留。常用的反相填料有C18(ODS)、C8(MOS)、C4(B)、C6H5(Phenyl)等。
(2)、聚合物填料
聚合物調(diào)料多為聚苯乙烯-二乙烯基苯或聚甲基丙酸酯等,其主要優(yōu)點是在PH值為1~14均可使用。相對與硅膠基質(zhì)的C18填料,這類填料具有更強的疏水性;大孔的聚合物填料對蛋白質(zhì)等樣品的分離非常有效。現(xiàn)在的聚合物填料的缺點是相對硅膠基質(zhì)填料,色譜柱柱效較低。
(3)、其他無機填料
其它HPLC的無機填料色譜柱也已經(jīng)商品化。由于其特殊的性質(zhì),一般于特殊的用途。如石墨化碳也用于正逐漸成為反相色譜填料。
這種填料的分離不同與硅膠基質(zhì)烷基鍵合相,石墨化碳的表面即是保留的基礎(chǔ),不再需其它的表面改性,該柱填料一般比烷基鍵合硅膠或多孔聚合物填料的保留能力更強,石墨化碳可用于分離某些幾何導(dǎo)構(gòu)體,又由于HPLC流動相中不會被溶解,這類柱可在任何PH與溫度下使用。
氧化鋁也可用于HPLC,氧化鋁微粒剛性強,可制成穩(wěn)定的色譜柱柱床,其優(yōu)點是可在PH高達(dá)12的流動相中使用。但由于氧化鋁與堿性化合物作用也很強,應(yīng)用范圍受到一定的限制,所以未能廣泛應(yīng)用,新型氧化鋯填料也可用于HPLC,商品化的僅有聚合物涂層的多孔氧化鋯微球色譜柱,應(yīng)用PH范圍1~14,溫度可達(dá)100℃。由于氧化鋯填料幾年才開始研究,加之面臨的實驗難度,其重要用途與優(yōu)勢尚在進(jìn)行中。